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鏈霉素(Str)快速檢測試劑盒

鏈霉素(Str)快速檢測試劑盒

產(chǎn)品型號: 0.1 ppb

所屬分類:獸 藥 殘 留 ,激素類ELISA快速檢測試劑盒

產(chǎn)品時(shí)間:2025-07-10

簡要描述:鏈霉素(Str)快速檢測試劑盒可檢樣本:肌肉、水產(chǎn)、肝臟、蜂蜜、牛奶

詳細(xì)說明:

鏈霉素

快速檢測試劑盒說明書

一、原理

本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物鏈霉素將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗鏈霉素抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物鏈霉素的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物鏈霉素的含量。

二、試劑盒特性

  • 試劑盒靈敏度:   0.1ppb
  • 孵育溫度:       37
  • 孵育時(shí)間:       30min30min15min
  • 樣本檢測下限

  ··············································  1 ppb

雞肝、牛奶 ······································  4 ppb

 蜜/蜂王漿 ···································  2 ppb

  • 交叉反應(yīng)率

鏈霉素  ··········································   100%

慶大霉素  ······································· ﹤0.1%

雙氫鏈霉素  ····································  108%

卡那霉素  ······································· ﹤0.1%

  • 樣本回收率

    奶  ····································  85±22%

雞肉組織  ····································  80±22%

蜂蜜/蜂王漿   ······························  75±22%

三、試劑盒組成

1

微量測試孔

每條8孔,一板12條

2

標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶

(1ml/瓶)

0ppb

0.1ppb

0.4ppb

1.6ppb

6.4ppb

25.6ppb

3

酶標(biāo)記物

12ml

紅色帽

4

抗體工作液

7ml

藍(lán)色帽

5

底物A液

7ml

白色帽

6

底物B液

7ml

黑色帽

7

終止液

7ml

黃色帽

8

20X濃縮洗滌液

40ml

白色帽

9

10X濃縮復(fù)溶液

50ml

透明帽

四、所用儀器、試劑

具備的儀器:酶標(biāo)儀、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)、恒溫箱、恒溫水浴鍋

微量移液器:單道 20~200µl、單道100~1000µl、多道 30~300 µl

      劑:氫氧化鈉、乙腈、正己烷、三氯yi

五、樣本前處理步驟

  • 樣本處理前須知

(a)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時(shí)要更換吸頭。

(b)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

  • 樣本前處理需配制:

配液1  0.5%三氯yi酸溶液

取0.5g三氯乙suan加去離子水定容100ml。

配液2  3%三氯乙suan溶液

取3g三氯乙suan加去離子水定容100ml。

配液3  1M NaOH溶液:

稱4g NaOH加去離子水定容至100ml。

配液4  0.1M NaOH溶液:

稱0.4g NaOH加去離子水定容至100ml。

配液5  樣本復(fù)溶液:

將10X濃縮復(fù)溶液用去離子水1:9稀釋。

  • 樣本處理:

a)牛奶處理方法

  • 取牛奶1ml,按1:39稀釋,混合30s。(50µl牛奶+1950µl樣本復(fù)溶液)
  • 取50µl用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):  40 

b)雞肉處理方法

  • 取2±0.05g去除脂肪的勻漿樣本,加4ml 3%三氯yi酸,充分混勻2min; 室溫4000r/min以上,離心10min;
  • 取上清液100µl,加入100µl0.1M NaOH,再加入300 µl樣本復(fù)溶液,充分混勻;
  • 取50µl用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):  10 

c)雞肝處理方法

  • 取2±0.05g去除脂肪的勻漿樣本,加6ml 0.5%三氯yi酸和2ml乙腈,充分混勻5min;
  • 室溫4000r/min以上,離心10min;
  • 取2ml上清液加入2ml正己烷,充分混勻靜置3min,取0.5ml下層清亮液體,室溫4000r/min以上,離心5min;
  • 取50µl下層清亮液(若有分層,須去除掉上層液體取下層清亮液體),加入450µl樣本復(fù)溶液混勻,混合30s;
  • 取50µl用于分析。

    樣本稀釋倍數(shù):  40

d)蜂蜜、蜂王漿處理方法

  • 稱量1±0.05g 樣本加入2ml 去離子水,振蕩至*溶解;
  • 室溫4000r/min以上離心10 min。
  • 100µl上清液,加入400µl樣本復(fù)溶液混勻,混合30s;
  • 取50µl用于分析。

樣本稀釋倍數(shù): 10 

六、 酶標(biāo)免疫分析程序:

  • 測定前應(yīng)須知:
  • 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫(20~25)。
  • 使用之后立即將所有試劑放回2~8
  • 在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性,正確的洗板操作是ELISA測定程序中的要點(diǎn)。
  • 所有恒溫孵育過程,避免光線照射,用蓋板膜蓋住微孔板。
  • 操作步驟:
  • 從2~8冷藏環(huán)境中取出所需試劑,室溫(20~25)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
  • 取出框架及需要數(shù)量的微孔,將不用的微孔放入自封袋,保存于2-8
  • 配液:將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按所需用量配制洗滌液
  • 編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
  • 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50µl /孔,然后加入抗體工作液50µl/孔,用蓋板膜封板,37℃環(huán)境中反應(yīng)30min
  • 倒出孔中液體,將酶標(biāo)板倒置在吸水紙上拍打,去除孔中液體。加入250µl/孔洗滌液,15-30s后倒出孔中液體,用吸水紙拍干,如此重復(fù)操作共洗板5次。
  • 酶標(biāo)記物:加入酶標(biāo)記物100µl/孔,用蓋板膜封板,37℃環(huán)境中反應(yīng)30min。取出酶標(biāo)板,如前述洗板5次。
  • 顯色:每孔加入底物A液50µl,再加底物B液50µl,輕輕振蕩混勻,37環(huán)境中避光顯色15min
  • 測定:加入終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,5min內(nèi)讀數(shù)),測定每孔OD值。

七、結(jié)果判定

結(jié)果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光度值與其所含鏈霉素量成負(fù)相關(guān)。

1、粗略判定:

用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.3,樣本2的吸光度值為1.0,標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是:0ppb為2.243; 0.1ppb為1.816;0.4ppb為1.415;1.6ppb為0.74;6.4ppb為0.313;25.6ppb為0.155。則樣本1的濃度范圍是6.4ppb~25.6ppb;樣本2的濃度范圍是0.4ppb~1.6ppb,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中鏈霉素實(shí)際濃度。

2、定量分析

(1)百分吸光率的計(jì)算,標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的吸光度值的平均值(雙孔)除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘以100%,即

百分吸光(%)=

B

×100%

B0

B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以鏈霉素標(biāo)準(zhǔn)品濃(ng/ml)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中鏈霉素實(shí)際濃度。

若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。

八、 注意事項(xiàng)

  • 室溫低于25或試劑及標(biāo)本未回到室溫(20~25)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
  • 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)伴隨著標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
  • 混合要均勻,否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
  • 反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
  • 不要使用過了有效日期的試劑盒;稀釋或攙雜使用會(huì)引起靈敏度、OD值變化;不要交換使用不同批號的盒中試劑。
  • 不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
  • 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。標(biāo)準(zhǔn)品1的吸光度值小于0.5時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
  • 該試劑盒jia反應(yīng)溫度為37,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

九、儲藏條件和保質(zhì)期

  • 儲藏條件:試劑盒于2~8保存,不要冷凍。
  •  質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。

提示:酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣,酶標(biāo)板仍然正常有效,不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請放心使用。

 

慶大霉素檢測試劑盒

喹諾酮檢測試劑盒

氟苯尼考檢測試劑盒



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