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雞禽流感抗體檢測試劑盒的操作方法及注意事項
更新時間:2019-08-26 點擊量:2767
       雞禽流感抗體檢測試劑盒用于評估養(yǎng)雞場雞禽流感疫苗免疫狀況及感染雞的血清學(xué)輔助診斷。本試劑盒采用間接ELISA法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被禽流感抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清,經(jīng)過溫育后,若樣品中含有禽流感特異性抗體,則與包被板上的抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;加入酶標(biāo)二抗,與檢測板上的抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物;在微孔中加入TMB底物液,經(jīng)酶催化形成藍色產(chǎn)物,加入終止液終止反應(yīng)后,用酶標(biāo)儀450nm波長測定反應(yīng)孔中的吸光度A值。
  雞禽流感抗體檢測試劑盒的操作步驟:
  1.取預(yù)包被的檢測板(根據(jù)樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各1孔,取陰性及陽性對照各100μl分別加入反應(yīng)孔中,空白對照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。
  2.蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
  3.小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔(約350μl),靜置1分鐘后甩掉。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。
  4.每孔加酶結(jié)合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。
  5.小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌3次,方法同2。切記在干凈吸水紙上拍干。
  6.每孔先加底物A液50µl、再加底物B液50µl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。
  7.每孔加終止液50μl,使反應(yīng)終止,10分鐘內(nèi)測定結(jié)果。
  雞禽流感抗體檢測試劑盒的注意事項:
  1.試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,使用前應(yīng)搖勻,使用后放回2~8℃。
  2.不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時應(yīng)防止試劑污染。
  3.底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應(yīng)該注意防護。
  4.TMB(底物B液)不要暴露于強光和避免接觸氧化劑。
  5.檢測板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2~8℃)。
  6.所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。
  7.嚴(yán)格遵守操作說明可以獲得的結(jié)果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須。
  8.血清稀釋板為一次性用品,不得重復(fù)使用;血清稀釋板的較大容量為300μl/孔。

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

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