WB實驗注意細節
1. 細胞樣本，收細胞時， PBS預冷。
2. 組織樣本在取材時離體組織應盡快凍存，可以置于液氮中迅速冷凍，使用組織勻漿機進行勻漿時， 一次研磨時間不宜過長， 40s左右即可，如研磨不充分，可再次研磨。
3. PMSF應注意搖勻至無結晶時方可使用。
4. 冰上裂解時，可以晃動以使裂解充分。
5. 裂解后的樣本盡量分裝保存，避免反復凍融，盡快變性使用。
6. BCA定量時盡量不使用96孔板最邊緣一圈（由于有些儀器邊緣效應）。
7. 樣本可以根據具體情況稀釋合適的倍數再進行定量，以免超出標曲范圍。
8. BCA定量時，可以使用儀器中速輕微震蕩3-10秒，混勻96孔板內液體，再進行測量。
9. 變性時，注意加熱后小心管蓋爆開。
10. 配膠時，板子一定徹底清洗干凈。
11. 配膠的各組分注意充分混勻。
12. 點樣時，多余的孔可以用loading buffer補齊。
13. 轉膜時， 一定帶手套才可以觸碰濾紙和膜，以防污染。
14. 轉膜不可放反，牢記黑膠白膜，注意電極正負極。
15. 封閉時， BSA或牛奶一定充分溶解。
16. 抗體種屬要注意區分。
17. 洗膜要充分。
18. 顯影液應滴加均勻。
從2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗技術及論文潤色服務，協助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年，是您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯系。
實驗技術服務：
|
|
|
|
聯系電話：服務熱線：400-665-0203
聯系人：楊小姐
聯系傳真：QQ：847724139（微信同號）
聯系郵箱：yanjinbio@163.com
聯系地址：上海市北青公路6725弄6號2幢2層B區
微信公眾號-關注我們最新動態
